中药防治鱼类水霉病的研究进展
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中药防治鱼类水霉病的研究进展
张皓瑜,张伟洁,王芊祺,王云澍,姜楠
(山东中医药大学,山东 济南 250355)
水霉病是水生动物常见真菌疾病[1],又称白毛病和肤霉病,能经不同鱼类相互传播,危害性较大[2],故该疾病防治的重要性不容小觑。目前,因常规西药治疗方法针对性差等原因,学界部分学者将研究重点放在了中药提取物上,企图找到天然植源性抗水霉菌药物。笔者整理了近年来学者的相关研究,现进行综述。
1 水霉病概述
1.1 发生机制
水霉病为真菌性疾病[3],是淡水养殖动物常见疾病,常发生于冬春季节[4],水霉菌是水霉病的病原体,由两种管状菌丝构成:外菌丝呈灰白棉絮状,向外伸出鱼体组织;内菌丝较外菌丝纤细而分支多,根附于动物表皮损伤处以吸收营养,能造成鱼鳞脱落,表面溃疡[5],还能使病鱼烦躁不安,运动异常。侵入鱼体内的水霉菌,能够分泌蛋白分解酶分解蛋白质,导致鱼类衰弱无力,食欲不振,日益消瘦[6]。
1.2 症状表现
附着在病鱼表面的菌丝会大量繁殖缠绕,造成感染部位溃烂坏死,可见感染部位由初始感染的圆形变为不规则斑块,当感染面积超过25%时会引起病鱼死亡[7]。咽、鳃部感染会造成病鱼呼吸、消化系统功能衰竭,最终致多器官衰竭[8]。
2 中药治疗鱼水霉病研究进展
目前,根据不同中药的作用机理,中药防治水霉病的方法有浸泡法、喷洒法和饲喂法。
2.1 浸泡法
2.1.1 机理研究
浸泡法常用来防治鱼卵水霉菌,主要应用苦参、五倍子、山苍子、黄芩等中药材。
苦参中主要成分是苦参碱,有研究发现苦参碱对多种真菌有抑制作用[7],能抑制细胞膜麦角固醇生物合成从而破坏细胞膜结构,起到抗真菌作用[10];同时可双向调节免疫机能,低浓度时提高免疫细胞免疫功能,高浓度时抑制免疫表达而减轻炎症[11]。五倍子可能通过影响真菌氧化磷酸化过程干扰其代谢进而改变细胞结构与功能,发挥抗真菌作用[12],其主要抗真菌部位为乙酸乙酯[10]。山苍子是我国特有的植物香料,有研究表明其具有良好的抗真菌作用[13][14],能抑制真菌细胞膜和细胞器功能[15]。有研究表明,山苍子精油可能通过破坏真菌细胞膜与细胞质膜从而渗入细胞致其裂解死亡[16]。石浩[17]等人发现,黄芩抗菌机制为破坏菌丝内抗氧化酶活性,当提取物浓度在300~500 mg/L时,对水霉菌孢子萌发抑制率超过90%,400~500 mg/L时对水霉菌的菌丝生长抑制率超85%,随提取物浓度升高对水霉菌丝总糖含量、氨基酸的含量、蛋白质含量影响逐渐增强,1000 mg/L时达到顶峰。
2.1.2 治疗方案
将中药煎剂按一定比例稀释后浸泡,防治鱼卵水霉发生效果显著,但对需要流水孵化的受精卵应用中草药防治水霉病效果不理想[18]。
曾本和[19]等人研究中药防治异齿裂腹鱼鱼卵水霉的效果发现,大黄、黄芩、苦参、五倍子、山苍子五种中药能降低鱼卵水霉菌致死率,提高孵化率,抑制和杀灭鱼卵水霉。李绍戊[20][21]等人研究中药方剂对不同种类鱼卵水霉病防治效果发现,由苦参、野菊花等组成的复方对山女鳟受精卵水霉病防治效果最佳;由丁香、黄连、土槿皮等组成的复方对哲罗鲑受精卵水霉病防治效果最佳。周志明[22]等人研制了中药复方治疗水霉病,该方主要由五倍子、射干、黄芩等中药组成,可长期浸泡鱼卵;该方在1 mg/L时抗菌作用强,还有很好的真菌病预防作用。蔡焰值[23]采用水煎法用乙醇浸泡提取法提取十几种中药药液,应用于斑点叉尾鮰受精卵发现水煎法疗效更好;安全性方面,对鱼苗肌肉进行检测,重金属达标,未检出农残物,安全可靠。
2.2 喷洒法
2.2.1 机理研究
喷洒法是采用向鱼池喷洒中药的方法来治疗鱼体水霉菌,常用药包括黄连、石菖蒲、五倍子、乌蔹莓等。
现代药理学研究证明黄连具有抗真菌作用[24],其所含成分小檗碱中的季铵离子能够促进细胞吞噬,从而增强非特异性免疫反应,提高抗真菌感染能力[25][26]。石菖蒲为天南星科植物,现代药理学研究发现石菖蒲具有抗真菌作用[27]。辣蓼草的体外试验表明其含有的黄酮类成分和丙酮粗提物有抗菌作用,后者能够抑制菌丝生长,从而抑制真菌活性[28][29]。李京民[30]等人研究发现乌蔹莓所含有的棕榈酸、胡萝卜苷等具有抑制真菌生长的作用。张兴悦[31]研究发现枫场叶提取液能够破坏真菌菌丝,从而抑制真菌生长。朱恒英[32]等研究发现油茶饼提取物油茶皂苷具有抗真菌作用,且对玫瑰色毛癣菌抑制作用最强。
2.2.2 治疗方案
药液喷洒法具有操作简便、高效等特点,喷洒于池塘的中药液不仅能减少浮游植物量,还能净化水质,降低水体中氮、磷、氨氮及化学需氧量没激活鱼类免疫因子[33]。
张礼虹[34]等人在应用西药聚维酮碘与硫醚沙星的基础上,配合中药五倍子煎剂泼洒以巩固治疗,病鱼感染得到了有效控制。刘洋[35]治疗鳝鱼水霉病,除应用五倍子食盐溶液喷洒外,还认为石菖蒲混合食盐,人尿浸泡后亦有不错的疗效。周爱国[36]等人应用五倍子、大黄复方水煎剂泼洒,治疗患水霉病的大刺鳅143尾,治愈率81.1%。宋萍[37]研究得出每亩用辣蓼草、乌蔹莓和枫杨叶,按照5∶1∶4的比例混合煎汁,稀释后全池喷洒的方法。此外还有筛选试验发现,黄连、油茶饼和大黄的抑菌效果明显,未来可进行深入研究[38]。
2.3 饲喂法
2.3.1 机理研究
在饲料中掺入中药投喂是治疗鱼水霉病的方法之一,常用中药大黄、人参、金银花、板蓝根等。
大黄所含成分大黄素具有抑制真菌作用,通过影响真菌细胞复制过程,导致其无法正常复制而死亡[39]。人参具有增强免疫力的功能[40],其中所含的人参皂苷Rg1能够促进T细胞增值,提高巨噬细胞吞噬能力,人参皂苷Rg3能显著提高体液免疫功能,增强抵抗力[41][42]。金银花具有解热、抗炎功能[43],谢新华[44]等研究表明金银花能显著提高吞噬细胞吞噬能力,从而调节免疫力,提高抗感染能力。现代药理学研究证明板蓝根具有抗菌,抗炎功能[45][46],胡兴昌[47]等研究表明板蓝根凝集素能促进 T细胞增殖与发育,进而提高免疫功能。
2.3.2 治疗方案
李世华[48]将黄连、大黄等中药材磨粉后拌料投喂感染鱼群,1日1次,连用5日为一疗程,重者连用2个疗程,治疗5日后鱼种停止死亡,恢复吃食。赵江贺[49]研究中药复方防治锦鲤病害发现,在水中加入中药制剂能增强锦鲤抵抗力,改善体色;在亲本养殖过程中,投喂人参、金银花、板蓝根等中药组成的中药颗粒剂亦能提高锦鲤抗病能力。
3 总结与展望
淡水鱼水霉病目前在全国多个产区高发,已成为渔业大患[50],除了应当积极预防外,正确有效的治疗也必不可少。目前,长期以来的常用药孔雀石绿因其高毒性已被禁用,而近年来常用的水杨酸等广谱抗菌药对水霉特异性差,效果不明显[51],因此学界转而研究天然植源性抗菌药,即中草药提取物,目前已取得一定成果。
未来,笔者认为可以尝试将中医治疗的基础理论融入水霉病的防治中,构建水产行业的“辨证论治”体系,结合鱼患病时的情况有针对性地开具处方或许能提高疗效。该方案目前鲜有研究者,发展空间大,值得进一步探索。
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