培养光合细菌常遇到的问题解析及处理方式
一、概述
广义的光合细菌包括蓝藻(又称蓝细菌),是一类能够进行光合作用的细菌;狭义的光合细菌专指能进行光合作用而不产氧的一类细菌。常被用于污水处理、水产养殖、种植业、苗种培育等多种用途。例如:沼泽红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、类球红菌等。
二、生物特性与功能
光合细菌能利用简单的小分子有机物质,在有光厌氧和无光微氧的情况下生长繁殖。因其具有以下特性,所以常备用作水产养殖用的水环境改良剂和生物饵料:
1.降氨氮:光合细菌能利用水体中的氨态氮进行生长繁殖,所以具有较好的降氨氮效果;
2.抗逆性好:耐高温,耐强光,即使在盛夏的中午39℃的温度下也能较好生长;
3.菌体蛋白含量高:据文献报道,光合细菌的菌体蛋白粗蛋白含量可高达60%以上,是良好的良好的生物饵料;
4.可以与乳酸菌、芽孢杆菌联合使用,用于抑制蓝藻的爆发。
光合细菌1(放大倍数1200倍)
光合细菌2(1200倍)
三、光合细菌的培育过程
海水光合细菌育种与筛选
一级菌种培育
二级菌种培育
光合细菌菌液量产
四、光合细菌培养中常见问题
光合细菌菌液正常的颜色因菌种的不同而略有差异,但通常是酒红色、血红色和砖红色这几种颜色,正常情况下,菌液比较清澈、色泽亮丽。
但在实际生产过程中经常出现下列三种情况:
1.变暗变黑
如图所示,瓶装菌液颜色暗淡无光泽,瓶底出现很多颗粒状絮状物沉淀,继续培养颜色会越来越黑;
瓶底出现大量的暗红色、黑色沉淀
菌液变为暗红甚至褐色
瓶底出现大量沉淀物
2.变黄变绿
如图所示,菌液颜色变为偏黄绿、偏棕色,在不摇动瓶子的前提下,轻轻倒出上层菌液,会发现底部有一层或薄或后的绿色沉淀物。
菌液变黄变绿
菌液变棕色
瓶底有薄薄一层绿色沉淀物
经培养为绿色杂藻居多
3.混浊附壁
如图所示,表面看颜色红亮,但实际倒出后的菌液颜色较浅,盛装菌液的瓶壁附着严重。
附壁严重
实际菌液色泽浅
瓶底瓶身附壁严重
五、问题解析
(一)光合细菌菌液发暗发黑的原因
1.所用的水源未经净化处理,尤其是地下水(井水)、山泉水等,这些水体源通虽然看起来纯净度比较高,但往往会出现重金属含量超标,譬如铁含量超标等。光合细菌带负电荷,重金属离子通常都是带正电荷,依据同性相斥、异性相吸的原理,它们会发生互相吸引而絮凝沉淀,因重金属比重大,故这些絮团常出现在培养容器的底部;
底部暗红色絮状沉淀
过滤纸过滤后
水源重金属对光合细菌的影响图示
正常菌液
加金属化合物的瞬间(中间瓶)
加金属化合物5分钟后
对重金属进行处理后
2.菌种老化或出现部分死亡
光合细菌自身生长也是有一个适宜的环境要求的,温度、光照强度都是有一定上限的,温度一般控制在20-39℃之间,光照强度一般控制在40-200μmol/(m²•s),相当于2200-11000lux的光照强度;如果长时间处于超高温、超高光的情况下,部分活菌会老化、死亡,这些老化的死亡的菌容易粘连成团沉于底部;
3、培养周期过长或者保存时间过长,同样也会导致颜色暗黑。如果稀释后菌液颜色仍呈艳红色则属于正常。
(二)光合细菌变绿的原因
光合细菌属于光合自养生物,它既能利用小部分的小分子有机物,也能利用一些氮磷钾无机盐,和藻类的生长营养需求具有较大程度的重叠,在相同的培养基培养的情况下,光合细菌能够生长,藻类同样可以生长。
1.菌种纯度的问题
培养光合细菌时,如果出现菌液变绿,一个很大的因素在于菌种不纯,菌种中混杂有绿藻,在环境条件合适时,绿藻和光合细菌都能生长,最初光合细菌占优势,慢慢绿藻能占为优势,如果长期观察的话,会发现很独特的现象,菌液由最初的"上红下绿"转变为"下红上绿",如果时间足够长,又会变成"上红下绿",实则是光合细菌与微藻的协同与竞争关系的体现。
2.水源的问题
因光合细菌菌液市面上也不算太贵,培养光合细菌的用水通常都采用的地下水或者自来水或者海水,这些水源里都会含有一些微藻(或者微藻的休眠孢子),常规的过滤难以实现完全无藻;即使采用消毒剂杀藻,虽然可以杀灭一些藻细胞,但同样对藻类的休眠孢子效果不理想,一旦环境条件适合,这些休眠孢子就会复苏,继而生长慢慢变绿。
3.其他方面的因素
培养容器未经处理、培养基混杂有休眠的藻细胞、或者长时间露天作业(空气中、雨水里)都有可能带来微藻的种子,可以说微藻无处不在,只要有一定的湿度,通常都会有微藻的细胞,无非是多和少而已。
下雨天所接的"无根水"
雨水培的藻类
经镜检,雨水培养的藻,既有小球藻也有丝状藻和蓝藻。
雨水培藻的处理
(三)光合菌液浑浊附壁的原因
光合菌液混浊附壁的原因大致有两种情况:
1.光合细菌的菌液纯度不够高,里面含有其他杂菌,这些杂菌容易繁殖菌液混浊和附壁。
2.培养基的因素
有些培养基因使用的原料配方不同,培养时浊度就很大,有些培养基原料还加有些增稠的成分。
(来源:生物通道)
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