鳜回交子代早期形态、生长与摄食特征

魏 磊，赵金良，刘 伟，钱叶周，吴 超，钱 德

(1.上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室，水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心，水产科学国家级实验教学示范中心，上海 201306；2.池州市秋浦特种水产开发有限公司，安徽池州 247104)

回交是杂交方式之一，是通过杂交子代与轮回亲本间再次杂交，从而使得轮回亲本一些优良性状在杂交后代中得到稳定遗传，同时，非轮回亲本的一些优良性状也得以保留[1]。回交在鱼类杂交中较为广泛，如云斑尖塘鳢(Oxyeleotrismarmoratus)♂与线纹尖塘鳢(O.lineolatus)♀的杂交子代与云斑尖塘鳢(♂)回交，回交子代的斑纹偏向于云斑尖塘鳢，同时保留了线纹尖塘鳢生长快、耐粗饲等特性[2]；“易捕鲤”(GS-01-002-2014)即是以[(大头鲤Cyprinuspellegrini♀×散鳞镜鲤C.carpioL.mirror♂)♀×(黑龙江鲤C.carpiohaematopterus♀×散鳞镜鲤♂)♂]后代 ♀与大头鲤♂回交获得的子一代群体为基础群体，再经选育获得的，该回交种栖息于水体中上层，起捕率高[3]。回交子代有时也会表现出超过轮回亲本的性能优势，如用斑点叉尾鮰(Ictaluruspunctatus)♀与长鳍叉尾鮰(I.furcatus)♂杂交F1，与长鳍叉尾鮰♀回交，回交子代的体重生长性状明显超过长鳍叉尾鮰[4]。

鳜是我国传统的名贵淡水经济鱼类，主要养殖种类有鳜(Sinipercachuatsi)和斑鳜(S.scherzeri)，两者均为肉食性鱼类，但不同种类的外形、生长、饵料系数等都不相同。目前，已采用斑鳜♀×鳜♂杂交方式获得了杂交新品种—“秋浦杂交斑鳜(GS 02-005-2014)”，平均体重比斑鳜提高160%以上，饵料系数降低[5]。而采用斑鳜♂×鳜♀获得的“长珠杂交鳜(GS 02-003-2016)”，7月龄时平均体重是斑鳜的3.2倍[6]。鉴于杂交在鳜鱼育种上取得了明显成效，在杂交鳜(斑鳜♀×鳜♂)基础上，采用回交方式获得了斑鳜♀×杂交鳜♂回交子代，通过比较其与斑鳜、杂交鳜在早期发育阶段的外形(体斑和体型)、生长和摄食特性，评价轮回亲本与非轮回亲本各自性状的遗传特征，为鳜杂交育种深入研究提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 材料

实验在安徽省池州市秋浦特种水产开发有限公司进行。“秋浦杂交斑鳜”(以下简称“杂交鳜”)是由斑鳜♀×鳜♂杂交而得，回交子代由斑鳜♀×杂交鳜♂回交而得。2018年4月16日，同时开展斑鳜、杂交鳜和回交子代繁育。其中，杂交鳜受精卵采用人工授精方式获得；斑鳜和回交子代受精卵均采用自然受精方式获得，受精卵放入孵化环道内流水孵化；孵化水温为15～20 ℃。出膜第5天，仔鱼开口，开口饵料鱼为刚出膜的鲢、鳙鱼苗。开口一周后，再将仔鱼从孵化环道转入水泥池(7 m×8 m×1 m)内进行培育，饵料鱼为鲢、鳙和鲫鱼苗。每天早、晚各投喂1次。

1.2 方法

1.2.1 早期体斑和体型

鳜出膜后，回交子代、杂交鳜和斑鳜鱼苗每日采样1次，每次10尾，用解剖镜观察色素分布、体斑形成，同时拍照记录。观察时间为初孵仔鱼至斑纹稳定期(40-45日龄，不同种鱼时期略有差异)。45日龄，测定三种鱼苗头部隆角(头后背前与鱼体长轴间夹角)、体高/体长指标。

1.2.2 生长测量

在鱼苗孵化出膜至孵化后45日龄，每日采样1次，每次10尾，用游标卡尺测量鱼苗全长。计算日均增长率：AGL=(Lt-L0)/D

式中：AGL为全长日均增长率(mm/d)；Lt为测量的末全长；L0为测量的初全长；D为实验的间隔天数。

1.2.3 摄食量测定

出膜后20日龄，三种鱼苗各取30尾，于20 cm×30 cm×20 cm的水族箱中进行饲养，装有循环水装置，定期更换新水，实验周期为20 d。每天分别在8时和16时投喂鲢、鳙饵料鱼苗。当天上午第一次投喂前，称量投喂饵料鱼质量，记为m1；下午第二次投喂饵料鱼质量，记为m2；第二天上午投喂前，测定剩余饵料鱼质量，记为m3。每隔5天，各随机抽测10尾试验鱼苗的质量，并进行三次重复，计算出日均增重率和饵料系数。

AGW=(Wt-W0)/D×N

DF=(m1+m2-m3)/N×D

FC=3(m1+m2-m3)/(Wt-W0)

式中：AGW为日均增重率(g/d)；Wt为称量的末体质量；W0为称量的初体质量；D为实验间隔天数；N为取样鱼的数目；DF为平均日摄食量(g/d)；m1、m2、m3分别为饵料鱼的质量；FC(Feed Coefficient)为饵料系数。

1.2.4 数据处理分析

实验数据用SPSS19.0软件统计分析，P<0.05表示差异显著。数据作图均采用GraphPad Prism5.0软件。图片使用Adobe Photoshop CC 2018处理。

2 结果与分析

2.1 色素和斑纹比较

如图1所示，三种鱼初孵仔鱼黑色素主要分布在卵黄囊上，回交子代和斑鳜背部前段也有少量分布。出膜第2、3天，臀鳍基部位置均出现黑色素。出膜第4天，头部出现黑色素，回交子代和斑鳜背部前段黑色素分布增多，杂交鳜背部前段开始出现黑色素，且躯干后段中间位置也出现黑色素。出膜第5天，回交子代和斑鳜躯干后段中间位置未见黑色素出现。黄色素主要分布于头部和卵黄囊，三种鱼的黄色素分布差异不明显。

图1 回交子代、斑鳜和杂交鳜1-5日龄色素变化Fig.1 Pigment changes of S.scherzeri，backcrossing progeny and hybrid at day1-5

三种鱼早期的斑纹形成如图2所示。11-13日龄，三种鱼黑色素分布位置差异不大，未见明显斑纹；16-18日龄，黑色素除在躯体前半段大量分布外，背鳍硬棘、软棘基部，臀鳍基部也有分布，躯干后端中间位置分布明显；23-24日龄，斑纹初步形成，三种鱼背部出现5个黑色鞍状带，回交子代和斑鳜躯干后段中间位置出现黑色横带，杂交鳜沿背鳍硬棘基部向下出现纵带；43-45日龄，回交子代和斑鳜体侧斑块排列紧密，横向规则排布，而杂交鳜斑块较稀疏，排列不规则。

2.2 头部隆角、体高/体长比较

如表1所示，45日龄，回交子代、斑鳜和杂交鳜头部隆角分别为25.48°±0.85°、24.52°±0.65°、29.44°±1.34°，回交子代、斑鳜与杂交鳜差异显著。三种鱼体高/体长值分别为0.26±0.03、0.25±0.09、0.32±0.05，回交子代、斑鳜与杂交鳜差异显著。

2.3 全长比较

回交子代、斑鳜和杂交鳜初孵仔鱼全长分别为(4.24±0.21)、(4.17±0.24)、(4.27±0.32)mm，45日龄全长分别为(78.52±1.55)、(55.51±0.71)、(83.81±1.22)mm。回交子代、斑鳜和杂交鳜的日均增长率分别为1.65、1.14、1.78 mm，回交子代、杂交鳜与斑鳜间差异显著(见表2)。

图2 回交子代、斑鳜和杂交鳜体斑形成Fig.2 Body spots formation of S.scherzeri，backcrossing progeny and hybrid

表1 45日龄三种鱼的头部隆角、体高/体长值Tab.1 Head ridge angle，body height/body length value of three kinds of fish at 45 days age

注：同行数字后不同字母代表差异性显著，下同。

表2 三种鱼的初孵全长、45日龄全长和日均增长率比较Tab.2 Comparison of the initial hatching length，45 days age full length and average daily growth rate of the three kinds of fish

2.4 摄食水平比较

如表3所示，回交子代、斑鳜和杂交鳜的日均摄食量分别为(0.217±0.02)、(0.153±0.01)、(0.220±0.04)g，日均增重率分别为(0.067±0.02)、(0.031±0.03)、(0.073±0.06)g，回交子代、斑鳜与杂交鳜的饵料系数分别为2.99±0.16、4.40±0.22、2.76±0.13。回交子代和杂交鳜的日均摄食量大于斑鳜的，回交子代和杂交鳜的饵料系数显著低于斑鳜的。

表3 三种鱼的日均摄食量、日均增重率和饵料系数比较Tab.3 Comparison of daily food intake,average daily weight rate and feed coefficiontof the three kinds of fish

3 讨论

3.1 鳜回交子代体斑和体型

本研究中，出膜1-5日龄，回交子代的黑色素分布与斑鳜类似，与杂交鳜差异明显；如图2所示鱼体发育的前两个阶段中，三种鱼差异不明显，而后两个阶段差异较明显。总之，回交子代早期色素分布和体斑特征与斑鳜相似。回交子代的体斑特征与母本斑鳜相似，这可能是因为斑鳜作为轮回亲本时，回交子代的遗传物质组成比例更多来自于斑鳜的缘故[7]，也可能是控制体斑特征的功能基因来源于母本。

在鱼类杂交中，杂交子一代的性状通常处于两亲本的中间状态[8]。在鳜鱼杂交子一代中，宓国强等[9]研究发现正交杂交鳜(鳜♀×斑鳜♂)与鳜相似，背部向下出现垂直躯干的条带，而单建杰[10]研究认为反交杂交鳜(斑鳜♀×鳜♂)体侧无垂直条带，与斑鳜相似，正反杂交子代体侧斑纹呈不规则分布，体高/体长值分别为：鳜0.36±0.04、斑鳜0.26±0.02、正交子代0.29±0.02、反交子代0.30±0.02，杂交子代体型介于鳜与斑鳜之间，正反交子代间差异不大。本研究中，回交子代头部隆角和体高/体长值分别为25.48°±0.85°、0.26±0.03，与斑鳜无明显差异，回交子代较稳定遗传了轮回亲本斑鳜的体型特征。

本研究中，斑鳜既作为轮回亲本，又作为杂交母本，回交子代表型上偏向斑鳜，除了斑鳜遗传物质组成比例较高外，一定程度上也受母系效应影响[11]。

3.2 鳜回交子代早期生长与摄食

在鱼类回交育种中，回交子代的生长性能有时会接近杂交子一代或子二代，如建鲤[元江鲤♀×荷元鲤(荷包红鲤♀×元江鲤♂)♂回交子代]与元江鲤生长速度接近，且成活率、起捕率高[12]；萨尼F1(萨罗♀×尼罗♂)♀×尼罗♂回交子代的生长速度与尼罗接近[13]。在本研究中，45日龄，回交子代生长速度略低于杂交鳜，两者差异不明显。孙际佳等[14]研究认为，在正交子一代中，鳜♀×斑鳜♂杂交种0.3月龄、7月龄和11月龄的生长速度与鳜无显著差异，杂交子一代遗传了鳜的快速生长速度；而许淼洋[15]也研究发现，反交杂交子一代初孵仔鱼全长(4.12±0.12)mm介于双亲之间，出膜后0-43日龄，杂交子一代全长日平均增长率为1.10 mm，与鳜1.54 mm较为接近，杂交子一代的早期生长速度偏向于鳜。即正反杂交子代生长均表现偏向生长速度较快的亲本。本研究中，在45日龄内，回交子代生长速度与杂交鳜接近，回交子代的快速生长性能偏向杂交鳜，这也可能与原始杂交亲本鳜(非轮回亲本)的生长性能在杂交后代中能稳定遗传有关[16]。

另外，就三种鱼的摄食水平进行比较，回交子代与杂交鳜的日均摄食量差异不大。回交子代和杂交鳜的饵料系数显著小于斑鳜，饵料系数反映了鱼类对饵料的利用率大小，饵料系数越小，饵料利用率越大。研究表明，初始体重在10 g左右的鳜、杂交鳜和斑鳜30 d的平均日摄食量分别为(6.1±0.31)、(5.26±0.33)、(4.24±0.23)g，日增重率分别为(1.171±0.180)、(1.019±0.104)和(0.433±0.078)g[17]。在相同的养殖条件下，不同鳜鱼的生长速率次序与其摄食量大小次序相对应，推测鳜鱼的生长快慢与其日均摄食水平间正相关。

杂交育种中，选择合适亲本与正确配组是育种工作的关键，而在回交育种中，轮回亲本选择对子代性状有着重要影响[18]。本研究初步分析了鳜鱼回交子代早期形态、生长与摄食量表现，以及性状遗传特征，可为今后鳜鱼杂交育种中亲本选配与预期效果提供重要参考。