铜铁合剂、敌百虫、甲醛和聚维酮碘对异育银鲫“中科3 号”鱼苗的急性毒性试验

戴瑜来，谢楠，戴杨鑫，许宝青，林启存，王宇希

（杭州市农业科学研究院，浙江 杭州 310024）

异育银鲫“中科3 号”（Carassius auratus gibelio“CASⅢ”）是中国科学院水生生物研究所培育的鲫品种，因其具有生长快、抗病力强、出肉率高、营养丰富、养殖效益好等特点，深受养殖者和消费者欢迎。但高密度、集约化养殖会增加其疾病发生的风险，研究发现，苗种培育期是异育银鲫“中科3号”的疾病易发期。目前，关于异育银鲫“中科3 号”对于药物敏感性方面的研究鲜见报道。现采用静态急性毒性试验法，开展了铜铁合剂、敌百虫、甲醛和聚维酮碘对异育银鲫“中科3 号”的急性毒性试验，分析异育银鲫“中科3 号”对药物的敏感性，旨在为异育银鲫“中科3 号”苗种养殖期间的病害防治和科学用药提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验所用异育银鲫“中科3 号”（以下简称试验鱼）来自杭州市农业科学研究院水产研究所，体格健康，体表无损，体长为（3.2±0.16）cm，体质量为（0.8±0.22）g。

1.2 试验药物

铜铁合剂[纯度99.0%，m（硫酸铜）∶m（硫酸亚铁）=5∶2，国药集团化学试剂有限公司]；敌百虫（含量≥90%，南通江山农业化工股份有限公司）；聚维酮碘（有效含量10%，武汉九州神农药业有限公司）；甲醛（纯度37.0%～40.0%，西陇化工股份有限公司）。

1.3 试验条件

每种药物准备15 个玻璃缸（96.5 cm×47.5 cm×49 cm），另设一个对照缸，每个玻璃缸水体积均为150 L，试验用水为经存放并曝气处理24 h 的自来水，pH 值6.98～7.80，ρ（溶解氧）6.7～7.25 mg/L，水温（25.5±0.5）℃，每个缸各设一个充气头，投放20 尾试验鱼。

1.4 试验方法

试验前，将试验鱼暂养于玻璃缸中1 周，正常投饲，待其适应实验室的环境后，采用静态急性毒性试验法进行试验。先进行预试验，每个药物分别设置5 个浓度梯度组（Ⅰ—Ⅴ）和1 个对照组（对照组为不含药物的曝气自来水，其他条件均相同），浓度梯度按照等对数间距设置，同时设2 个平行，见表1。

表1 试验鱼用药浓度 mg/L

试验药物先配置成高浓度母液，现配现用。用药后，8 h 内连续观察试验鱼中毒症状和死亡情况，8 h 后按用药后24，48，96 h 记录试验死亡鱼数量，其间及时捞除死亡个体（以丧失游泳能力，触碰无反应为准）。试验期间不投饲，且以对照组不出现死鱼为本试验进行的必要条件。

1.5 半致死浓度和安全浓度的计算

根据24，48，96 h 不同药物、浓度条件下受试鱼的死亡率数据，采用改进寇氏法计算24，48，96 h 的半致死浓度（LC。

标准误差（S）=i（Σp（1-p）/n）1/2，

LC的95%置信区间=lg（lg LC±1.96S lg LC）。

式中：X——试验组最大剂量的对数；

i——相邻组浓度对数之差；

p——各组的死亡率，%；

∑p——各组死亡率的总和，%；

n——每组受试鱼数量，尾。

安全浓度（SC）根据24 h 和48 h 的半致死量浓度求得。

SC=48 h LC×0.3/（24 h LC/48 h LC）。

2 结果与分析

2.1 铜铁合剂的毒性试验

将铜铁合剂母液按试验浓度要求，稀释后泼洒在养殖试验鱼的玻璃缸中。经观察发现，各缸中的试验鱼起初均未有明显反应，1 h 后可见高浓度组（9.06 和15.00 mg/L）试验鱼的平衡能力明显受到影响，游动无力。受药物影响，鱼体色变浅，体表黏液增多，并有白色絮状黏附物，2 h 后死亡。铜铁合剂对试验鱼的毒性试验结果见表2。

表2 铜铁合剂对试验鱼的毒性试验结果

2.2 敌百虫的毒性试验

将敌百虫母液按试验浓度要求，稀释后泼洒到养有试验鱼的玻璃缸中。2.5 h 后试验鱼出现异常，6 h 后死亡。受药物影响，鱼体扭曲，翻转侧游，死鱼体表发白，鱼体僵硬，鳃丝发紫。敌百虫对试验鱼的毒性试验结果见表3。

表3 敌百虫对试验鱼的毒性试验结果

续表

2.3 甲醛的毒性试验

将甲醛母液按试验浓度要求，稀释后泼洒在养殖试验鱼的玻璃缸中。3 h 后试验鱼出现异常，8 h 后死亡。受药物影响，试验鱼出现急速旋转、焦躁不安、上下窜游、来回游动的现象，不久后沉入缸底，对刺激反应敏感。甲醛对试验鱼的毒性试验结果见表4。

表4 甲醛对试验鱼的毒性试验结果

2.4 聚维酮碘的毒性试验

将聚维酮碘母液按试验浓度要求，泼洒到养有试验鱼的玻璃缸中。发现试验鱼最高浓度组（200.0 mg/L）在用药后10 min 时，出现乱窜、打转，不久后失去平衡，呼吸缓慢，浮于水面或沉入水底；在30 min 时，死亡。聚维酮碘对试验鱼的毒性试验结果见表5。

表5 聚维酮碘对试验鱼的毒性试验结果

3 讨论

3.1 4 种渔药对试验鱼的毒性强度

药物对试验鱼毒性的大小常用LC来衡量。本试验结果表明，药物对异育银鲫“中科3 号”毒性由强到弱依次为：铜铁合剂、敌百虫、甲醛、聚维酮碘。参照《危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法》（GB/T 21281—2007），96 h LC≤1 mg/L 时为急性毒性Ⅰ级，1 mg/L<96 h LC≤10 mg/L 为急性毒性Ⅱ级，10 mg/L<96 h LC≤100 mg/L 为急性毒性Ⅲ级。4 种药物对试验鱼的毒性分类为：铜铁合剂和敌百虫为急性毒性Ⅱ级；甲醛为急性毒性Ⅲ级，而聚维酮碘则不在急性毒性Ⅰ级至Ⅲ级范围内。

3.2 用药注意事项

硫酸铜与硫酸亚铁合剂在生产上主要用于杀灭中华鳋、车轮虫、斜管虫、舌杯虫、水网藻和青苔等，其对鱼类的毒性受水中溶解氧、pH 值、有机物含量、盐度等影响。本研究发现，硫酸铜对试验鱼的SC 是0.68 mg/L，高于淇河鲫（0.16 mg/L），低于异育银鲫“中科5 号”（0.94 mg/L），相比较铜铁合剂常用浓度（0.7～1.0 mg/L）要低。因此，本规格试验鱼在使用铜铁合剂时要注意药物使用安全。

敌百虫是一种广谱性有机磷类杀虫剂，主要用于杀灭体表的中华鳋、鱼鲺、锚头鳋、指环虫和三代虫等。本试验中，敌百虫对试验鱼幼鱼的SC 是2.04 mg/L，远高于异育银鲫的SC（0.016 mg/L），高于敌百虫的常用浓度（0.3～0.7 mg/L）。因此，敌百虫对于本规格试验鱼而言是一种较为安全的药物。

甲醛是一种有刺激性臭味的化学试剂，可凝固蛋白和溶解类脂，在气态或液态下，均具有强烈的杀菌作用，是一类广谱的杀菌剂。本研究中甲醛对于试验鱼的SC 是10.98 mg/L，低于彩鲫的SC（21 mg/L），也较甲醛的常用浸泡浓度（30～40 mg/L）要低，但从试验鱼试验浓度（25 和39.13 mg/L）组的死亡情况，以及浸泡方法接触药物时间较短来分析，甲醛可安全用于该规格试验鱼的浸泡。而甲醛在生产上作为遍洒药物因用量大而导致其应用受到一定的限制。

聚维酮碘是聚乙烯吡咯烷酮与碘的络合物，对大部分细菌、真菌、真菌孢子及部分病毒均有一定的杀灭作用。本试验结果中，聚维酮碘的SC 为28.83 mg/L，高于异育银鲫（7.48 mg/L），远高于常用浓度（0.2～0.5 mg/L）。因此，聚维酮碘对于本研究规格的试验鱼是一种较为安全的药物。