对虾弧菌病的二次感染与防治

朱宇嘉 ，辛年香 ，冯 豆 ，朱志东 ，蔡延渠 ，邓剑壕 ，吕 莉 ，董碧莲 ，朱盛山

（1.广州市普精生物科技有限公司，广东广州，510663；2.广东药科大学，中药开发研究所，广东广州，510006）

联合国粮农组织（FAO）报告指出，弧菌病一直困扰着科学家、动物卫生主管部门和养殖者，很难采取有效的预防和治疗措施[1]。弧菌病令养虾风险性大幅增加，全球尚无有效防治弧菌病的药物。文献[3]介绍的KFJ复方包括半边莲花、土香薷、檵木叶等8种植物，其提取物制剂（弧菌专家）在实际养殖环境中对弧菌病治疗效果，证实“弧菌专家”是能有效防治弧菌病的药物。但是，二次感染却令人难于控制。本研究从对虾的肝胰腺及其包膜入手，比较使用弧菌专家前后肝胰腺及其包膜变化与对虾病症的关系，同时检测肝胰腺弧菌培养情况，为拟订预防二次弧菌病方案提供临床试验依据。

1 材料与方法

试验地点：广东省江门市新会区大鳌镇百顷村冯某一口池塘和广东省湛江市企水镇企水湾邓某一口高位池，两地试验分别记为案例一与案例二。

试验时间：案例一于2018年1月13日至2018年1月15日间进行，案例二于2018年1月26日至2018年2月5日间进行。

表1 试验虾塘基本数据

两虾塘基本数据统计如表1所示。表1中虾塘水质数据（盐度、pH值、氨氮、亚硝酸盐、溶解氧）为病情诊断当天所测数据。

1.1 使用“弧菌专家”前病症观察

案例一：1月9日，虾塘开始出现对虾吃食减少情况，到1月13吃料量由一餐25 kg下降至一餐20 kg，每日三餐。虾塘水面下风口处有白（浮）便4条/m2，长度3～12 cm。抛网观察病虾：肠道红肿，肝胰腺萎缩，白膜覆盖不完整等病症，用TCBS培养皿检测肝胰腺有大量弧菌。

案例二：2018年1月26日，病虾活动能力减弱，虾身瘦弱，断肠、空肠，肝胰腺萎缩、糜烂、白膜消失，拖便、浮便、食欲减退，慢料、减料，白便、偷死。吃料量由一餐25 kg下降至一餐15 kg，每日三餐。

1.2 治疗与试验方法

两案例均采用“弧菌专家”按标示量进行治疗。治疗需连续用药2 d，早晚各1次。根据“弧菌专家”用法用量表和注意事项计算用药量，按药料比1：3的比例拌料后于虾塘均匀投喂。

每次用药前从虾塘捞取对虾10尾，观察对虾症状，观察分体表症状观察和解剖观察。其中体表症状观察记录虾体各种症状，解剖观察即剥壳后记录对虾肝胰腺症状。用药后半小时记录对虾吃料情况。用药2 d后每天于早晨第1次喂料前捞取对虾10尾，进行体表症状观察与解剖观察。

2 试验结果

2.1 一次用药效果

案例一：1次用“弧菌专家”后，对虾症状出现好转，吃料虾肝胰腺增大趋于正常，棕色，白膜覆盖面积加大（覆盖率约80%）。肝胰腺弧菌TCBS检测发现，弧菌数量明显减少。

案例二：虾的活力明显增强，基本没有趴边、拖便、断肠，白便减少，肝脏白膜比较完整，虾体色比较通透，偷死减少，吃料加快，TCBS弧菌培养检测肝胰腺弧菌量较少。

2.2 用药两天后效果

案例一：用药2 d，病虾体表症状完全消失，体色通透，肠道饱满。解剖发现肝胰腺正常充满血色，白膜覆盖基本完整，肝胰腺弧菌TCBS培养弧菌量少。

案例二：2 d用4次药后，吃料基本恢复正常。观察并剖取吃料虾肝胰腺和肠道，可见肝胰腺白膜覆盖基本完整，肠道呈棕黑色饱满状态。取肝胰腺捣碎后涂抹TCBS培养皿，24 h后观察培养弧菌结果正常。

2.3 停药两天后症状

案例一：停药2 d后，对虾未发现病症，对虾肠道饱满。解剖观察发现白膜覆盖完整。

案例二：停药2 d后，对虾体表未发现症状。解剖观察发现白膜覆盖率约为80%。TCBS培养检测发现肝胰腺有少量弧菌。

2.4 停药4 d后症状

案例一：肠道饱满度较两天前有所下降，肝胰腺白膜覆盖率下降（覆盖率约50%），TCBS培养发现肝胰腺弧菌量回升。虾塘吃料速度放缓。

案例二：肝胰腺白膜基本消失，虾体出现发红症状，TCBS培养检测肝胰腺含大量弧菌。虾塘出现偷死症状（每日排除死虾约30尾）。

3 讨论

3.1 肝胰腺白膜与弧菌感染的关系

在2个试验案例中，“弧菌专家”用药期间对虾白膜覆盖率逐渐扩大。用药2 d后，2个案例中对虾白膜基本恢复完整。于此同时，虾塘中弧菌病症状逐步好转，TCBS培养检测发现对虾肝胰腺弧菌数量不断下降。到停药第2天，案例一中对虾没有2次感染迹象，案例二中，白膜覆盖率下降，肝胰腺出现少量弧菌，体表没有观察到症状。停药后第4天，对虾肝胰腺白膜覆盖率均出现下降现象，其中，案例一中的对虾肝胰腺白膜覆盖率约为50%，此时，对虾出现减料等早期病症。案例二中的对虾肝胰腺白膜基本消失，对虾病症严重，出现偷死的现象。

由2个试验案例可见，对虾肝胰腺白膜覆盖率与弧菌病病情严重程度呈反相关关系。笔者推论肝胰腺白膜具有防御弧菌感染的功能。白膜覆盖不完整将导致弧菌入侵肝胰腺，继而出现各种弧菌病病症。

在案例二试验塘中，笔者自停药后第5天起开始使用“弧菌专家”进行预防。2次用药（1 d 1次，连用2 d）后，对虾吃料速度恢复正常，预防开始后第3天取虾解剖观察发现，对虾肝胰腺白膜基本覆盖完整，肝胰腺无任何病症。

3.2 预防二次感染

病虾用药2 d后，肝胰腺好转，但其保护肝胰腺免遭弧菌等入侵的屏障白膜覆盖仍不完整，无法防止弧菌入侵肝胰腺。虾塘和塘中死虾体内弧菌含量高，活虾好吃死虾，导致弧菌入侵二次感染。尚处于康复期的病虾，要及时预防（先间隔2～3 d，后慢慢延长）。当出现活力下降，拖便，慢料，断肠，肝脏和肠道发红等情况应及时用药，最好是提前用药，或加大用药。

4 总结

该文通过2个案例研究对虾弧菌病发病与肝胰腺白膜覆盖率之间的关系。试验发现，对虾肝胰腺白膜能够抵御弧菌入侵对虾肝胰腺。正常对虾肝胰腺白膜覆盖完整，肝胰腺无弧菌，病虾往往肝胰腺白膜覆盖不完整甚至消失，肝胰腺检测出大量弧菌。应对弧菌病应当以预防为主，定期使用弧菌专家预防，有助于保护对虾肝胰脏。如对虾出现病症或白膜覆盖不完整，应及时采用“弧菌专家”进行治疗。治疗后由于白膜处于恢复阶段，弧菌仍有可能入侵肝胰脏，为防止二次感染，应采用“弧菌专家”进行预防。